常见问题
PCR实验室根据实验步骤一般分为四个功能区,从前到后分别为试剂贮存和准备区、样本制备区、样本核酸扩增区、扩增产物分析区,每个功能区的作用均不同,所以在设计建设时也有不同的要求,下面就对PCR实验室各功能区的作用及规划建设要求作一个简单说明。
作用:贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。
规划建设要求:试剂和用于样品制作的原材料应该直接运送到该区域,不得经过其它区域,并且要在本区域制备所需的试剂。本区域对于气流压力的控制没有严格要求。
作用:样本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及加入样品至扩增反应管、测定DNA的合成。
规划建设要求:本区域气流压力相对于领近区域为正压,避免临近区的气溶胶污染,另外在加样操作中可能会发生气溶胶污染,所以实验人员应避免在本区域内不必要的走动。
作用:DNA扩增,DNA模板加入到主反应混合液制备反应混合液。
规划建设要求:本区域气流压力相对于领近区域应为负压,以避免气溶胶从本区泄漏,同时实验室人员要避免在本区域内不必要的走动。个别操作(如加样)应在超净台内进行。
作用:扩增片段的测定。
规划建设要求:本区域是主要的扩增产物污染来源,因此本区域气流压力相对领近区域应为负压,防止扩增产物的扩散。
综上所述,PCR实验室规划建设要做好区域的划分和洁净通风系统的设计,高效结合各个独立功能区,严格控制气流压力,对新风进行过滤,有效排除室内污染,控制实验室的洁净度,保证各功能区的空气环境满足要求。